毕竟小鼠有可能会抓挠,因而针对小鼠的vns中,电极直接接触神经干、以确保刺激效率。



最后,通过双光子实时成像采集egfp强度。



而量化指标,胆碱能神经元激活率看egfp和区域荧光强度变化;黏液分泌看tdtoato与囊泡出胞速率……



最终,得出结论:vns组,刺激后十分钟,肠神经丛egfp强度暴涨三倍,意味着胆碱能神经元被vns手术激活。



同时,杯状细胞tdtoato信号爆发,黏液分泌速率提升四倍!



而相比之下,假手术组,则没有这些变化。



阿托品组由于有拮抗剂的存在,上述效应完全被阻断。



至此,足以证明vns通过胆碱能通路促粘液分泌!



“接着就是vns驱动阿克曼菌特异性定植了……”



此时,众人的心里更加紧张。



这是重中之重。



也是决定一切的关键!



如果能证明vns可以增加阿克曼菌,这次的实验,就成功了一大半!



相反,若是得到相反的结果,恐怕之前的所有猜想都没有意义了。



“这次用的是什么小鼠?”



众人看向许秋。



许秋给出了介绍:“人源化菌群小鼠。



“具体来说,是无菌c57b-l/6小鼠灌胃健康人粪便菌液,其中含0001阿克曼菌。”



这等于是为此次试验量身定做的小鼠。



若非这里是协和,各种实验动物模型都能找到,可能仅仅是培育,就要数周的时间!



这也就是大平台的优势了。



换做是在临医,恐怕根本没法提供所需的各种实验动物!



许秋即便想要验证,可能也要当场自己选育、培养对应的小鼠,等真正做实验的时候可能已经是数个月之后的事情了。



而除开实验动物,此次所用的菌群追踪技术也尤为关键。



许秋在考察了协和研究所这边拥有的设备后,最终选定了fish时空定位。



探针,选取的是akk-405。



阿克曼菌-16s-rrna-cy5标记探针。



黏液层定位,则是wga-alexa488标记黏蛋白。



相比之下,成像方案就非常简单粗暴了。



直接麻醉下、经钢门插入共聚焦纤维内镜,动态拍摄回肠末端,直接观察菌群。



“这套方案也堪称完美了。”



此时,了解到许秋的具体实验规划后,莫雷蒂等人都啧啧称奇。



实验室普遍的手法,是16s测序。



但,16s测序缺点不少。



它只能反映菌群总量变化、无法区分活菌死菌,而且采样的过程中难免会破坏肠道结构。



这种破坏,对于讲究严格对照实验的科

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