直接在尾静脉注射fitc-右旋糖酐标记血管、注射罗丹明b标记细胞外间隙就行了。



没什么技术含量,研究生都能轻松驾驭。



“接下来,需要监测四项指标。”许秋说道。



其一,血脑屏障完整性。



这个很简单,直接用双光子实时成像血管渗漏就行。



第二,紧密连接蛋白cud-5。



cud-5是神经功能的守门人,从某种方面来说,血脑屏障的完整性与它有着密不可分的关系。



可以说,这个实验的重要指标,基本上都是靠cud-5验证的。



而检测cud-5本身,则是主要是靠免疫组化+westernblot(脑微血管)。



随后,是小胶质细胞活化,在皮层进行iba-1免疫荧光。



最后则是血清血脑屏障修复机制,利用气相色谱-质谱来判断,其涉及到了丁酸、乙酸的浓度,以及至关重要的cud-5基因敲除!



“这个方案……也做出了很多优化啊。”莫雷蒂有些愕然。



赖光圳等人也不禁点头,目中有着钦佩之色。



许秋的方法,和常规法子比起来,优势大上不少。



比如检验血脑屏障的完整性这一点。



常规手法,是监测分辨菌群的丰度。



而许秋则改换成了双光子实时成像血管渗漏,优点显而易见,便是可以动态观测血脑屏障修复过程。



其次,短链脂肪酸修复血脑屏障这一点,许秋对cud-5基因的敲除,堪称妙笔。



没有了cud-5基因,小鼠的血脑屏障应当会濒临崩溃。



此时补充短链脂肪酸,若是能够见到血脑屏障渗漏有所改善,则能证明,短链脂肪酸能够修复血脑屏障!



另外,监测小胶质细胞活化也有着巨大优势。



常规方法,只会在实验前、实验后查一次神经炎症。



但,活体小胶质细胞成像却可以实时追踪神经炎症消退。



这能清晰地反应阿克曼菌、短链脂肪酸等等在抗炎方面发挥的作用!



很快,各组实验小鼠都依然准备完毕。



第一件要做的事情,就是确定阿克曼菌已经定值成功,且血清丁酸上升。



经过检测,实验组的阿克曼菌,翻了将近七百倍。



而对照组用的是生理盐水,并无明显变化。



血清丁酸方面,实验组小鼠达到了85个单位,说明血清中丁酸含量已经达到可用的标准。



随后,是检测血脑修复的证据!



双光子成像显示,实验组渗漏面积比、与对照比相较而言,减少了百分之七十!



cud-5表达,westernblot灰度值上升百分之一百五十!



足足一点五倍。



这意味着,实验组的血脑屏障非常完整!



而evan

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