作为同时掌握着「二十年免疫疗法研发经验」「免疫学文献库(初级)」以及「分子模拟机制精通」的医生,许秋对这台实验的了解非常之深刻。



不需要谁认可,也不必证明,他给出的方案、做出的改良便是最合适的。



因而,许秋很快进入了下一步。



整个实验,一共有两个目标,或者是任意一个。



要么,证明彭月娇的血清可以和嗜沫凝聚杆菌特异性结合。



要么就找到让两者结合的办法。



实现任何一个,或许都能掲示彭月娇怪病的真相。



因而眼下,在第一步提取完抗体后,接着,就是鉴定抗原了。



“先超声破碎?”



段善继下意识地把自己代入了实验者的视角。



一般到了这一步,都是将灭活菌体超声破碎后,直接进行sds-pa分离,考马斯蓝染色寻找差异条带。



随后,对显色条带进行常规lc-s质谱鉴定,以及对比已知蛋白数据库……



但许秋这次的操作显然依然不同。



“为什么?”



轻车熟路之后,段善继直接就开口询问了。



这次他倒是没有这么尴尬了。



许秋也没有多说什么,手中动作不停的同时,给出了解答:“超声破碎灭活菌体,直接跑sds-pa找差异条带的话,这个过程中膜蛋白与脂多糖在电泳中迁移异常,关键抗原可能未被分离。



“而且,常规lc-s无法解析脂多糖复杂糖链结构。



“这个过程中还会忽略翻译后修饰,如糖基化等对表位的影响。



“风险的话不言而喻,便是错误锁定某个膜蛋白为交叉反应抗原,误导机制研究。”



简单来说,就是没有揪出真正的“病根”,寻仇寻错对象了!



而许秋采取的手法,也很刁钻。



他先利用tritonx-114两相分离,采取“先去除可溶性蛋白”,“后富集膜相关成分”的策略。



这可以将遗漏的多糖复杂糖链结构给找出来。



其次,苯酚-水法提取lps,对性地获取细菌脂多糖。



其可以锁定锁定半乳糖胺α-1,3连接为关键表位,直接消除了糖基化等对表位的影响。



而最后便是专攻糖链结构解析了。



常规质谱擅长蛋白而非糖脂,但许秋利用负离子模式aldi-tof/tof法,能在短时间内迅速锁定真正的致病因子。



这就像是大海捞针,以及给对方装上跟踪装置后再去追踪……



高下立判。



段善继此时已经有些愕然了。



他咽了下口水,道:“这能提高多少速度?”



这一步,就没法直接验证了。



也更不可能自己上手进行实验结果的对比。



毕竟,抗原鉴定涉及到了结合排查环节。本章未完,点击下一页继续阅读

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